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アイテム
豚の回腸リンパ腫の病理学的研究
https://az.repo.nii.ac.jp/records/3227
https://az.repo.nii.ac.jp/records/3227bd7b9763-afe9-412e-ba02-143d018cce86
| 名前 / ファイル | ライセンス | アクション |
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diss_dv_otsu0358 (29.8 MB)
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| Item type | 学位論文 / Thesis or Dissertation(1) | |||||
|---|---|---|---|---|---|---|
| 公開日 | 2013-02-05 | |||||
| タイトル | ||||||
| タイトル | 豚の回腸リンパ腫の病理学的研究 | |||||
| タイトル | ||||||
| タイトル | Pathological study on ileal lymphoma in swine | |||||
| 言語 | en | |||||
| 言語 | ||||||
| 言語 | jpn | |||||
| 資源タイプ | ||||||
| 資源タイプ識別子 | http://purl.org/coar/resource_type/c_46ec | |||||
| 資源タイプ | thesis | |||||
| 著者 |
谷本, 忠司
× 谷本, 忠司× Tanimoto, Tadashi |
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| 抄録 | ||||||
| 内容記述タイプ | Abstract | |||||
| 内容記述 | 豚の好発腫瘍の一つであるリンパ腫は，大部分が多中心型，一部が胸腺型の解剖学的病型をとり，消化器型や皮膚型の病型は極めて稀とされているが，最近，回腸や腸間膜リンパ節に原発した消化器型リンパ腫とみなしうる症例が相次いで報告され，著者も，肉用豚に見られた回腸原発リンパ腫を12例見いだした。豚リンパ腫では，パラフィン切片に応用可能な抗リンパ球抗体がないために，腫瘍細胞の起源や特徴が十分に明らかにされていない。そこで，第1部では，「ホルマリン固定・パラフィン切片とした豚組織中のリンパ球に反応する抗体の検索」，第2部では，第1部での研究成果を加え，「豚の回腸リンパ腫の組織学的，酵素細胞化学的，免疫組織化学的および超微形態学的検索」を実施した。 第1部 ホルマリン固定・パラフィン切片とした豚組織中のリンパ球に反応する抗体の検索 組織や血液中のリンパ球subsetを同定することは，ヒトと同様に家畜での正常および異常な免疫反応の解析，リンパ球増殖性疾患の診断のために重要である。単クローン性抗体を使った免疫組織化学的検索は，これらの研究手法として最も高感度で有用なものの一つである。豚のリンパ球を認識する単クローン性抗体が幾つか作製されているが，これらは通常，新鮮な細胞浮遊液あるいは組織の凍結切片にしか応用出来ない。そこで，ヒトあるいは豚のリンパ球に反応する抗体のうち，ホルマリン固定・パラフィン切片とした豚組織中のリンパ球に良好に反応する抗体があるかどうか，脱パラフィン切片を抗原賦活処理した後，免疫染色して検討し，また最適な抗原賦活処理法についても検討した。 材料と方法: 合計33種類のリンパ球に反応する抗体(抗ヒト抗体は25種類，抗豚抗体は8種類)について検討した。使用した抗体に対する最適な抗原賦活条件を決定するために，11種類の抗原賦活処理法(6種類の浸漬液を使ったマイクロウェーブ熱処理，2種類の市販浸漬液を使った熱湯中での加熱処理および3種類のタンパク分解酵素を使った酵素処理)を実施した。処理後，未処理切片と一緒に免疫染色した。 結果: 検討した合計33種類の抗体の内，polyclonal抗ヒトκ鎖抗体(Dako社)，polyclona1抗ヒトλ鎖抗体(Dako社)，CDw75(clone LN-1)，CD79α(clone HM57)，CD79β(clone B29/123)，HLA-DR(clone TAL.1B5)およびpolyclonal CD3(Dako社)の合計7種類のヒト抗体が，ホルマリン固定・パラフィン切片とした豚組織中のリンパ球に良好な反応性を示した。これらの交代の陽性部位は，ヒトでの報告とほぼ一致した。11種類の抗原賦活処理の効果を比較したところ，抗ヒト軽鎖抗体には，0.1% trypsinによる酵素処理が，抗ヒト・リンパ球交代には，0.1M Tris-HCl buffer(pH8.0)中でのマイクロウェーブ熱処理およびantigen retrieval solution(Dako社)中での熱湯による加熱処理が最も良い結果を得た。 結論: これら7種類の抗体は，ホルマリン固定・パラフィン切片とした豚組織中のリンパ球subsetの同定，鑑別および特徴づけに役立つ。また，脱パラフィン切片を適切に抗原賦活処理することにより，凍結切片にしか反応しない抗体や抗原由来の動物種しか反応しない抗体でもパラフィン切片に応用可能である。 第2部 豚の回腸リンパ腫の組織学的，抗祖細胞科学的，免疫組織化学的および超微形態学的検索 豚では，消化器型リンパ腫は極めて稀とされているが，最近，回腸や腸間膜リンパ節に発生した消化器型リンパ腫の症例が若干報告された。しかし，病理学的特徴，特に腫瘍細胞の起源や特徴は十分に明らかにされていない。著者も，1980～1994年に高知県で行った食肉衛生検査で発見した26例の豚のリンパ腫中に，回腸を侵す12例を見いだした。家畜の消化器型リンパ腫は，猫で最も特徴付けられており，その病理学的特徴はヒトのバーキットリンパ腫に似ているとされ，豚のリンパ腫の研究の中には，ヒトのバーキットリンパ腫との類似性を指摘したものがある。さらに，ヒトの非ホジキン型リンパ腫には，ヒトのバーキットリンパ腫の原因の一つとされているEpstein-Barr virus(EBV)が高率に検出されている。そこで，これらの知見を参考にしながら，豚の回腸原発リンパ腫の病理学的特徴，特に十分に検索されていない腫瘍細胞の特徴を明らかにするために病理学的検索を行った。 材料と方法: 12例の豚の回腸原発リンパ腫を病理組織学的，抗祖細胞科学的，免疫組織化学的および超微形態学的に検索し，得られた所見を猫やヒトの小腸リンパ腫並びにヒトのバーキットリンパ腫と比較し，特徴付けた。 また，免疫組織化学的手法を使った腫瘍細胞からのEBVの検出も試みた。 結果: 高知県で発生した豚の回腸原発リンパ腫の発生頭数は，10万頭あたり0.8頭で，豚のリンパ腫の解剖学的病型は，腸管型(12例，46%)あるいは多中心型(10例，38%)が目立った。いずれの症例も，体重減少あるいは下痢などの臨床症状はなかった。回腸リンパ腫は，パイエル板から孤立性腫瘍として発生し，早期の腸間膜リンパ節転移を伴いながら，リンパ濾胞を侵襲し，びまん性に増殖していた。回腸リンパ腫の細胞学的特徴は，ヒトのバーキットリンパ腫とは類似性がなく，the lymphoma-leukemia study group of Japan(LSG)分類により，11例がびまん性・大細胞非切れ込み型(DLNC)，胚中心細胞性に，1例がびまん性混合型(DM型)，抗体産生細胞性に分類された。DM型リンパ腫は，過ヨウ素酸シッフ(PAS)反応陽性の核内封入体(Dutcher body)や細胞質内封入体(Russell body)を有していた。二つの細胞型の腫瘍組織には，多数の星空像を示す組織球が見られた。回腸リンパ腫の腫瘍細胞は，しばしば回腸の筋層に浸潤し，列をなしていた(Indian file infiltration)。2列においては，特徴的な腹腔への漿膜転移が見られ，白血化もしていた。リンパ腫細胞には，alkaline phosphataseの細胞膜での陽性，acid phosphataseおよびα-naphthyl butyrate esteraseの細胞質でのびまん性陽性像が観察された。9例の腫瘍細胞には，免疫組織化学的に単クローン性の細胞質内免疫グロブリン陽性像が見られた(IgM-λ型7例，IgG-λ型1例，IgG-κ型1例)。10例の腫瘍細胞は，ヒトの汎B細胞マーカーであるCD79αとCD79βに陽性であった。リンパ濾胞の侵襲部では，S-100蛋白β亜分画陽性の濾胞樹状細胞(FDC)の網目状構造の破壊が見られた。腫瘍細胞には，超微形態学的に拡張した粗面小胞体や散在性あるいは集合性dense bodyが顕著であった。いずれの症例にも EBV抗原は検出されなかった。 結論: 豚の回腸リンパ腫は，パイエル板から孤立性腫瘍として発生し，早期の腸間膜リンパ節移転を示すこと，リンパ濾胞を侵襲し，びまん性に増殖すること，筋層に浸潤し，列をなすこと(Indian file infiltration)，腹腔に漿膜転移することなどの病理形態学的特徴を持ち，腫瘍細胞の免疫学的表現型としてIgM-λ型の免疫グロブリンを産生するB細胞性大細胞型リンパ腫細胞が多い。 |
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| Abstract | ||||||
| 内容記述タイプ | Other | |||||
| 内容記述 | In swine, the multicentric and thymic lymphomas are common, and alimentary and cutaneous lymphomas are believed to be quite rare. Recently, alimentary lymphoma in the ileum or the mesenteric lymph nodes has been described in a number of case reports. We also observed 12 cases of alimentary lymphoma affecting the ileum. In swine lymphomas, their cellular nature and characteristics have not been fully investigated for the lack of paraffin-reactive antibodies that recognize swine lymphocyte subsets and lymphoma cells. To overcome this limitation, in chapter 1, antibodies raised against human or swine lymphocytes were evaluated whether they react swine lymphocyte subsets in formalin-fixed, paraffin-embedded tissue sections pretreated with some antigen-retrieval methods. In chapter 2, based on the results of chapter l, immunohistochemical study on swine ileal lymphomas was done together with histological, enzymecytochemical, and ultrastructural examinations. Chapter 1. Evaluation of Antibodies Reactive with Swine Lymphocytes in Formalin-Fixed, Paraffin-Embedded, and Antigen-Retrieved Tissue Sections. Introduction: Typing of lymphocyte subsets in tissues and blood is important for understanding normal and pathologic immune reactions and for diagnosis of lymphoproliferative diseases in domestic animals, as well as human beings. Clarification of immune responses in swine in particular has been needed for human studies, because swine have been widely used as animal models of diseases of the cardiovascular system and skin, and of nutrition, transplantation, and malignant melanoma. Immunohistochemical labeling with monoclonal antibodies is one of the most sensitive and useful methods for such studies. Although some monoclonal antibodies that recognize swine lymphocytes have been generated, these antibodies usually require fresh cell suspensions or use of frozen tissue sections. The purposes of the study were to determine whether antibodies raised against human or swine lymphocytes are reactive with swine lymphocytes in formalin-fixed, paraffin-embedded, and antigen-retrieved tissue sections, and to determine the conditions suitable for antigen retrieval. Materials and Methods: A total of 33 antibodies (25 anti-human and 8 anti-swine) reactive with lymphocytes were evaluated. For antigen retrieval, we tested 11 methods: heating with 6 soaking solutions in a microwave oven, heating with 2 commercially available soaking solutions in a water bath, and enzyme digestion with 3 proteases. After these treatments, sections were immunostained along with untreated sections. Results: Of 33 antibodies tested, polyclonal anti-human κ light chain antibody (Dako), polyclonal anti-human λ light chain antibody (Dako), CDw75 (clone LN-1), CD79 α (clone HM57), CD79 β (clone B29/123), HLA-DR (clone TAL. 1B5), and polyclonal CD3 (Dako) were strongly reactive with swine lymphoid tissues, when deparaffinized sections were digested with 0.1% trypsin (for anti-human light chain antibodies), or heated in 0.1M Tris-HCI buffer (pH 8.0) in a microwave oven or with antigen-retrieval solution (Dako) in a water bath(for the rest of antibodies). All patterns of positive staining were essentially the same as those previously described in human beings. Conclusion: These 7 antibodies, with the antigen retrieval sequences, are helpful in identifying, distinguishing, and characterizing lymphocyte subsets in archival sections of swine lymphoid tissues. In addition, the findings indicate that some antigen-retrieval methods can appreciably expand the range of antibodies useful in paraffin-immunohistochemistry, including those that otherwise work only on sections from frozen tissues or from an antigen-derived species. Chapter 2. Ileal Lymphoma in Swine: A histologic, enzyme cytochemical, immunohistochemical, and ultrastructural study of 12 cases. Introduction: Although alimentary lymphomas are believed to be quite rare in swine, alimentary lymphoma in the ileum or the mesenteric lymph nodes has been described in a number of case reports. However, cellular origin and characteristics of these neoplasms have been not fully investigated. We also observed 12 cases of alimentary lymphoma affecting the ileum among 26 cases of swine lymphoma detected at meat inspection facilities in Kochi Prefecture from 1980 to 1994. In domestic animals, alimentary lymphoma is best characterized in cats and their pathological features are similar to those of Burkitt's lymphoma (BL). A study of swine lymphomas suggested that most of these cytology resembled those of BL. In addition, Epstein-Barr virus, an etilogical agent of BL, has been demonstrated in a high percentage of human non-Hodgkin's lymphomas by the immunohistochemistry and the Southern blotting method. On the basis of these knowledge, we characterized ileal lympomas in swine with pathological examinations. Materials and Methods: We characterized 12 cases of ileal lymphoma in swine and compared with feline and human alimentary lymphoma and Burkitt's lymphoma using histologic, enzyme cytochemical, immunohistochemical, and ultrastructural techniques. For the detection EBV, immunohistochemical examination was also done. Results: The prevalence of ileal lymphoma in Kochi Prefecture was 0.8 per 100,000 inspected swine, and the disease was predominantly alimentary (12/26, 46%) or multicentric (10/26, 38%). None of the swine showed any symptoms such as weight loss or diarrhea. The ileal lymphomas were a solitary neoplasm arosed from the Peyer's patches, along with early involvement of regional lymph nodes, and showed a characteristic pattern of follicular invasion leading to diffuse growth. The cytology of the ileal lymphomas did not resemble of that of BL, but following the lymphoma-leukemia study group of Japan (LSG) classification, 11 neoplasms were classified as diffuse lymphoma, large noncleaved cell type (follicular center cell nature) and one neoplasm was a diffuse lymphoma, mixed cell type (immunoglobulin-producing cell nature). The latter type lymphoma cells contained PAS-positive intranuclear and/or intracytoplasmic inclusions. Both types of lymphoma featured many intermingled "starry sky" histiocytes. The lymphoma cells often infiltrate into the muscular layer of the ileum in an "Indian file" pattern. Two cases also showed a characteristic transserosal metastasis into the abdomen and leukemic change. The lymphoma cells showed membrane positivity for alkaline phosphatase and diffuse cytoplasmic staining for acid phosphatase and non-specific esterase. Immunohistochemically, monoclonal intracytoplasmic immunoglobulins were shown in nine neoplasms (IgM-λ in seven, IgG-λ in one, and IgG-κ in one). The lymphoma cells of 10 cases were also positive for human pan-B cell markers; CD79 α (clone HM57) and CD79 β (clone B29/123). In the areas of follicular invasion, an attenuated network of follicular dendritic cells was visualized via an antiserum against the β subunit of S-100 protein. Ultrastructurally, strands of dilated rough endoplasmic reticulum and scattered or clustered dense bodies were noted. EBV antigen was not demonstrated in any of the cases. Conclusion: Swine ileal lymphomas possess a distinctive pathological entity, which is a solitary neoplasm arosed from Peyer's patches with early involvement of regional lymph nodes, follicular invasion leading to diffuse growth, infiltration of muscular layer in an "Indian file" pattern, transserosal metastasis into the abdomen, and predominantly large B cell type with IgM-λ type immunoglobulin expression. |
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| 学位名 | ||||||
| 学位名 | 博士(獣医学) | |||||
| 学位授与機関 | ||||||
| 学位授与機関名 | 麻布大学 | |||||
| 学位授与年月日 | ||||||
| 学位授与年月日 | 1996-10-02 | |||||
| 学位授与番号 | ||||||
| 学位授与番号 | 乙第358号 | |||||
| 著者版フラグ | ||||||
| 出版タイプ | AM | |||||
| 出版タイプResource | http://purl.org/coar/version/c_ab4af688f83e57aa | |||||
