@phdthesis{oai:az.repo.nii.ac.jp:00005424,
 author = {岡田, 夏樹 and OKADA, Natsuki},
 month = {2021-04-05, 2021-04-05},
 note = {Certain nematode larvae migrate to tissues of host organs and muscles, causing major disorder to the host at the site of predilection. Roundworms of the genus Toxocara use various animals as paratenic hosts, and the larvae migrate to the viscera and other host tissues. It is also known that Toxocara spp. larvae can cause human toxocariosis. However, there is little knowledge on the migration of Toxocara spp. larvae in the paratenic host, transmission between hosts, and the infection route to humans is also not clear. Therefore, the aim of this study is to investigate the infection route of the toxocarid larvae, their distribution in the various organs of paratenic host, and the prevalence of Toxocara spp. larvae in livestock, which serve as food for humans.

Toxocara cati larval migration to mouse fetuses through transplacental infection 
Toxocara cati has been demonstrated to show transmammary infection to the neonate, but little information on vertical transmissions, namely transplacental or intrautrine infections, are available. In the present study, we examined whether transplacental infection do occur in T. cati infection in mice or not. We orally inoculated T. cati embryonated eggs into the pregnant mice (n=7) twice on day 4 and 9 of gestation (10,000 in total/mouse). Twelve days after the first inoculation (16th day of gestation), necropsy was performed, and the internal organs, skeletal muscle and uterus, placenta, umbilical cord and fetus were removed separately. The number of larvae in each of the organs were counted. A total of 103 fetuses were obtained from 7 pregnant mice, and a total of 196 T. cati larvae were recovered from 74 (74/103, 71.8%) fetuses. In addition, a total of 26 larvae were recovered from 17 (17/103, 16.5%) placenta. This study showed that when mice were exposed to T. cati during pregnancy, the larvae migrate into the fetus in the maternal mouse, demonstrating that intrauterine infection of T. cati could be easily established.

Detection of larvae of Toxocara cati and Toxocara tanuki from the muscles of free-ranging layer chickens
There are many cases of toxocariosis in humans caused by the consumption of visceral organs of chickens, cattle and other ruminants. However, little is known about the actual infection of Toxocara larvae in livestock. In this study, we tried to detect nematode larvae by digesting breast meat, thigh meat, and liver of 50 free-range chickens in Kanagawa prefecture. The detected nematodes were subjected to species identification using the PCR method. Of a total of 50 chickens that were examined, one T. cati larva and one T. tanuki larva were detected in the breast meat of one chicken and the thigh meat of another chicken, respectively. This is the first report that T. tanuki larvae do infect chickens in the natural environment. It will be necessary to increase the number of chickens to be examined to understand the prevalence of Toxocara spp. larvae in domestic poultry in more detail. In conclusion, it is suggested that consumption of raw or uncooked chicken might be the cause of human toxocariosis.

Toxocara tanuki larval distribution in mice and the infectivity of tissue larvae
Toxocara tanuki is a nematode that parasitizes in the small intestine of raccoon dogs, and its prevalence is generally high. However, only little is known about the organ distribution of its larvae in the paratenic host and there is no information on its infectivity. In this study, we orally inoculated mice with T. tanuki embryonated eggs and examined their larvae distribution in the various organs of the host and their infectivity after some time. BALB/c and C57BL/6 mice (n=5 in each group) were inoculated with 1,000 T. tanuki embryonated eggs. Necropsy was performed on days 7, 31, 91 and 182 postinfection. The central nervous system (cerebrum, cerebrum and spinal cord), heart, lungs, kidneys, spleen, gastrointestinal tract, liver, and carcass were separated, and the number of larvae in each of the organs was counted. Larvae recovered from the liver of these mice were inoculated into ICR strain mice (n=6 in each group), which were later necropsied at days 21 postinoculation. Infectivity of larvae was evaluated from the ratio of the number of larvae inoculated to ICR mice and the number of larvae recovered from the same mouse. Larvae were recovered from all the ICR mice inoculated with T. tanuki eggs. Over 88.7% of the larvae were recovered from the liver. The larval recovery from ICR mice that inoculated with 182-day-old larvae recovered from the two strains of mice (BALB/c and C57BL/6) liver were 46.0 and 57.7%, respectively. The range of infectivity of T. tanuki larvae was 15.7-75.2% throughout the study. In this study, we have demonstrated that the most optimal site of predilection of T. tanuki larvae in mice was the liver in mice and they could maintain their infectivity for at least half a year.

 In this thesis, we presented new findings on the transmission route and larval migration of Toxocara spp. in the paratenic host tissues. In addition, we also demonstrated that not only T. cati but also T. tanuki could be detected from domestic chickens. These new findings will contribute to the improvement of public health and livestock hygiene as related to understanding the risk of human toxocariosis and examining the avenues of preventive measures., 【緒言】
　動物寄生性線虫の幼虫には宿主の臓器や筋肉などの組織に寄生するものがあり、寄生部位によっては宿主に障害を起こす。トキソカラ属回虫は各種動物を待機宿主にとり、幼虫が宿主の組織に寄生する。また、幼虫がヒトに寄生するとトキソカラ症を起こすことが知られている。他方、トキソカラ属回虫幼虫の宿主における移行経路や宿主間における伝播については不明な点が多く、さらに、ヒトへの感染経路も不詳である。そこで、本研究の目的をトキソカラ属回虫幼虫の待機宿主における体内移行および経済動物でのトキソカラ属回虫幼虫の感染状況を調べることとした。
\n第1章：胎盤感染によるマウス胎仔への猫回虫幼虫の移行
　猫回虫Toxocara catiは経乳感染することが確認されているが、胎盤感染や子宮内感染はしないとされている。今回、妊娠および非妊娠マウスへの感染実験を行い、猫回虫幼虫の組織分布における妊娠の影響および胎盤感染または子宮内感染の有無について検討した。猫回虫含仔虫卵5,000個を妊娠マウス7匹にそれぞれ妊娠4日および9日の2回、すなわち、マウス1匹あたり合計10,000個の虫卵を経口投与し、同週齢の非妊娠マウス7匹にも同様に投与した。初回投与後12日 (妊娠16日)に全てのマウスを剖検し、骨格筋、内臓、子宮、胎盤、臍帯および胎仔を摘出して塩酸ペプシンを用いて人工消化し、それぞれの組織内の幼虫数を調べた。猫回虫幼虫はすべての妊娠および非妊娠マウスから回収され、幼虫の大部分は骨格筋から回収され、一部は内臓、子宮、胎盤、胎仔から回収された。骨格筋、内臓、子宮の幼虫数に、妊娠と非妊娠マウス間の差は認められなかった。妊娠マウス7匹から合計103匹胎仔が得られ、74/103匹（71.8％）の胎仔から合計196匹の猫回虫幼虫が回収され、感染胎仔1匹あたり平均2.6匹の幼虫が回収された。また、17/103個（16.5％）の胎盤から合計26匹の幼虫が回収された。本研究は、ほとんどのマウス胎仔が子宮内感染によって猫回虫幼虫に感染することを示した。また、妊娠および非妊娠マウス間の回収幼虫数に差が認められなかったことから妊娠は猫回虫幼虫の垂直感染に直接影響しないことが示唆された。 
\n第2章：平飼採卵鶏の筋肉からのトキソカラ属回虫幼虫の検出
　トキソカラ属回虫は各種動物を待機宿主にとり、幼虫がヒトに寄生するとトキソカラ症を起こすことが知られている。ヒトへの主な感染源は、土壌や砂場の虫卵あるいは食肉に寄生する幼虫で、国内では、鶏や牛の食肉の生食が原因とされるヒトのトキソカラ症例は少なくない。しかしながら、経済動物でのトキソカラ属回虫幼虫の感染実態についてはほとんど知られていない。そこで、今回、鶏の組織における回虫幼虫の寄生を調査するために、神奈川県内の平飼採卵鶏50羽を供試し、胸筋、後肢筋および肝臓から塩酸ペプシン消化法を用いて回虫幼虫の検出を試みた。また、検出した幼虫はPCR法を用いて分子生物学的に種を確認した。50羽の鶏のうち1羽の胸筋および別の1羽の後肢筋からそれぞれ猫回虫幼虫および狸回虫幼虫が1匹ずつ検出された。本調査は、国内の養鶏場の鶏から実際にトキソカラ属回虫の幼虫を検出した初めての報告であり、狸回虫幼虫が鶏に寄生する事実を初めて明らかにした症例となった。今後、例数を増やして、国内の養鶏におけるトキソカラ属回虫感染の実態をより詳細に把握することは必要であるが、本調査により、鶏肉の加熱不十分調理や生食は人のトキソカラ症の原因になりうることが示唆された。
\n第3章：マウスにおける狸回虫幼虫の組織分布および感染力
　狸回虫Toxocara tanukiは狸の小腸に寄生する線虫で、寄生率は概して高い。一方、狸回虫の待機宿主や幼虫の組織移行についてはほとんど知られてない。今回、狸回虫のマウスへの感染実験を行い、幼虫の組織移行および感染力について検討した。狸回虫含仔虫卵1,000個をBALB/c系統およびC57BL/6系統のマウスに経口投与後7、31、91および182日に剖検し、中枢神経系、心臓、肺、腎臓、脾臓、胃腸管、肝臓および骨格筋を分離し、それぞれの組織から塩酸ペプシン消化法を用いて幼虫数を調べた。また、これらのマウスの肝臓から得られた幼虫を別のICR系統マウスに経口投与し、投与後21日に剖検して体内の幼虫数を調べた。その結果、虫卵を投与したマウスの全てから幼虫が検出され、幼虫の88.7%以上は肝臓から回収された。BALB/c系統およびC57BL/6系統マウスの系統間で肝臓の幼虫の分布に差は認められず、 BALB/c系統マウスとC57BL/6系統マウスはほぼ同様の組織分布を示したが、回収幼虫総数は、BALB/c系統マウスよりもC57BL/6系統マウスの方が多かった。ICR系統マウスからのBALB/c系統およびC57BL/6系統マウスの肝臓由来の幼虫の回収率は、組織内7-182日齢の幼虫で、それぞれ15.7-46.0％および20.1-57.7％であった。本研究は、マウスにおいて狸回虫幼虫の多くは肝臓に寄生し、少なくとも半年間高い感染力を維持することを示した。
\n【総括】
　本研究は、動物組織内に寄生するトキソカラ属回虫幼虫の感染経路および体内移行について、感染実験によって新知見を見いだした。また、実際に、野外の経済動物の筋肉においてトキソカラ属回虫幼虫が寄生する事実を明らかにした。これらの知見は、ヒトのトキソカラ症の発症リスクの把握と予防対策の検討に関連する公衆衛生および家畜衛生の向上に貢献するものである。},
 school = {麻布大学},
 title = {組織寄生性回虫類幼虫の感染経路および体内移行},
 year = {}
}