@article{oai:az.repo.nii.ac.jp:00004449, author = {代田, 欣二 and 萩原, 喜久美 and 中山, 裕之 and Shirota, Kinji and Ogihara, Kikumi and Nakayama, Hiroyuki}, journal = {麻布大学雑誌, Journal of Azabu University}, month = {Mar}, note = {近年,医学・生物学分野でタンパクや遺伝子の解析の為のツールとして,レーザーマイクロダイセクション(LMD)法が注目され,その成果が期待されているが,実際の研究への応用は始まったばかりで,データは蓄積されていない。そこで本研究は,1)LMD法によってラットの組織より特定の組織を切り出し,RT-PCR法あるいはリアルタイムPCR法によって標的遺伝子の増幅と定量化を試み,LMD法の遺伝子解析における有用性を確認すること,2)動物における腎糸球体疾患および腫瘍の病態と血管内皮増殖因子(VEGF)の関連を,LMD法を用いて遺伝子解析から明らかにするための基礎的データを得ることを目的として行われた。その結果,腎糸球体でのVEGFとその受容体遺伝子,卵巣における発育段階の異なる卵胞に発現するインヒビン等の遺伝子,肝臓における薬物代謝酵素および関連遺伝子の発現の定性/定量解析が本法で可能なことが明らかになった。また,免疫組織学的検索やRT-PCR法による検索によって,犬の腎疾患や腫瘍などの病理組織内のターゲット細胞/組織におけるVEGF遺伝子発現の解析に関する基礎的データが得られた。, Recent development of the laser microdissection (LMD) technique has been expected for the great contribution to the biomedical sciences as a novel laboratory tool. However, the application of the technique has not been well developed yet. The purpose of this study was to evaluate the effectiveness of the technique for gene analyses using RT-PCR or realtime PCR in the dissected target tissues of rats and to obtain the basic data for gene analysis using LMD technique to clarify the role of vascular endothelial growth factor (VEGF) in the tumors and nephropathies of animals. The results of this study revealed that LMD technique was very useful to detect and quantify local mRNA expression of VEGF and its receptor in the renal glomeruli of rats, Moreover, the LMD technique enable us to localize and quantify gene exprssion of some factors associating with development of ovarian follicles and drug-metabolizing enzymes and their relating factors in the liver. The immunohistochemical study and RT-PCR experiments on normal or neoplastic tissues of dogs revealed the gene and protein expression of VEGF in these tissues and provided us the basic information for the quantitative analyses of VEGF gene expression in dissected pathological tissues by LMD technique, especially those of the renal diseases and tumors., P(論文), 特集, application/pdf, FEATURE ARTICLES}, pages = {190--193}, title = {レーザーマイクロダイセクション法を用いた,病理組織からのターッゲット組織の回収と遺伝子解析の試み}, volume = {5/6}, year = {2003} }