{"created":"2023-06-19T07:18:10.765466+00:00","id":3335,"links":{},"metadata":{"_buckets":{"deposit":"cf20d5ff-8321-4b47-91c8-1218096f336a"},"_deposit":{"created_by":4,"id":"3335","owners":[4],"pid":{"revision_id":0,"type":"depid","value":"3335"},"status":"published"},"_oai":{"id":"oai:az.repo.nii.ac.jp:00003335","sets":["370:15:392"]},"author_link":["16482","16464"],"item_10006_date_granted_11":{"attribute_name":"学位授与年月日","attribute_value_mlt":[{"subitem_dategranted":"1998-04-09"}]},"item_10006_degree_grantor_9":{"attribute_name":"学位授与機関","attribute_value_mlt":[{"subitem_degreegrantor":[{"subitem_degreegrantor_name":"麻布大学"}]}]},"item_10006_degree_name_8":{"attribute_name":"学位名","attribute_value_mlt":[{"subitem_degreename":"博士(獣医学)"}]},"item_10006_description_22":{"attribute_name":"Abstract","attribute_value_mlt":[{"subitem_description":"It was assumed that the early establishment of rumen microorganisms in calves would be important for both the improvement of growth and the inhibition of the colonization of pathogenic bacteria in the intestinal tract. Therefore, to develop techniques for the early establishment of adult rumen microorganisms in calves, several experiments were carried out.\n\nExperiment I. Effect of oral administration to calves of fresh rumen fluid from healthy adult cattle on both the early establishment of rumen microorganisms and the improvement of growth\n In this experiment, calves were divided into four groups; calves administered fresh rumen fluid from healthy adult cattle within 2 to 3 hours after birth (group 1), calves administered fresh rumen fluid and autoclaved rumen fluid (AT-R) (group 2), calves administered AT-R (group 3), and non-administered control calves (group C). Oral administration of fresh rumen fluid from healthy adult cattle was effective in the early establishment of rumen microorganisms in the rumen of calves, as compared with non-administered calves. On the colonization of aerobic and facultative anaerobic bacteria in the rumen, the numbers of Lactobacillus spp. were much higher in calves in groups 1, 2, and 3 during the experimental period, as compared with the non-administered calves. The numbers of Streptococcus spp. were higher in calves in groups 2 and 3, as compared with calves in groups 1 and C. The number of Escherichia coli was lower in calves in groups 1, 2, and 3, as compared with the non-administered calves. On the development of anaerobic bacteria in the rumen, the numbers of lactate-utilizers were same in calves in both the rumen fluid administered groups and the non-administered group during the experimental period. Pectin-fermenters and xylan-fermenters, cellulolytic bacteria, and methanogenic bacteria developed early in the rumen of calves in groups 1, 2, and 3, as compared with the non-administered calves. Oral administration of fresh rumen fluid also promoted the colonization of protozoa in the rumen of calves. On the other hand, oral administration of AT-R did not promote the colonization of protozoa in calves, as compared with non-administered calves. Total volatile fatty acids (VFA) concentrations in the rumen were higher in the rumen fluid administered calves until 50 days of age, as compared with the non-administered calves. After 70 days of age, total VFA concentrations remained level at 40～50 mM in the administered calves. The total VFA concentration in the non-administered calves after 50 days of age was the same as that in the administered calves. The molar proportion of VFA in the rumen of the administered calves (groups 1, 2, and 3) was lower for acetic acid and inversely higher for propionic acid until 50 days of age, as compared with the non-administered calves. There was no difference in the molar proportion of VFA between the administered calves and the non-administered calves at 90 days of age. The intake of feed was higher in the administered calves until 90 days of age, as compared with the non-administered calves. The daily gain was significantly higher in the calves of group 1 than in the calves of the other groups.\n From these results, it is suggested that the oral administration of 100 ml of fresh rumen fluid for three consecutive days to new born calves was effective in both the early establishment of adult rumen microorganisms in calves and the improvement of animal growth.\n\nExperiment II. Influence of oral administration of representative rumen bacteria to a germ-free goat\n An experiment to investigate the influence of oral administration of major representative rumen bacteria isolated from bovine rumen to a germ- free goat was carried out. Nine species of rumen bacteria were orally administered to a germ-free goat during 35 to 39 days of age after birth. The goat administered rumen bacteria was euthanized at 60 days of age. The pH and total VFA concentration of the rumen contents of the goat were 6.98 and 25.9 mM, respectively. The numbers of Veillonella parvula and Streptococcus bovis were about 1,000 times higher in the rumen of the goat than in the lower digestive tract. Among the 9 species orally administered, S bovis, Prevotella (Bacteroides) ruminicola ss. brevis, Ruminobacter (Bacteroides) amylophilus, and Butyrivibrio fibrisolvens abundantly colonized the rumen.\n The oral administration of major representative rumen bacteria isolated from the rumen to a germ-free goat demonstrated that rumen bacteria, except cellulolytic bacteria, colonized not only the rumen of the goat but also the intestinal tracts.\n\nExperiment III. Effect of oral administration of fresh rumen fluid from healthy adult cattle on the ability of pathogenic Escherichia coli to colonize the digestive tract of newborn calves\n To confirm the usefulness of the early establishment of adult rumen microorganisms in calves, experiments were carried out to inhibit the colonization of pathogenic Escherichia coli in the digestive tract by oral administration of rumen fluid from healthy adult cattle to new born calves within 2 to 3 hours after birth. The new born calves which were not administered rumen fluid died of watery diarrhea following the administration of E. coli NAS-10 (09: K99: Sta+: LT-). On the other hand, no occurrence of diarrhea was observed in the newborn calves which were administered rumen fluid prior to the administration of E. coli NAS-10. The numbers of E. coli NAS-10 in the duodenum were markedly lower in the new born calves administered rumen fluid followed by E. coli NAS-10, as compared with the calves administered E. coli NAS-10 without rumen fluid. Morphologically, a greater variety of bacteria were observed in the rumen, duodenum and rectum of newborn calves that were administered rumen fluid as compared with non-administered calves. Furthermore, the total VFA concentration of the intestinal contents of newborn calves administered rumen fluid were much higher as compared with non-administered calves.\n The results obtained in this investigation showed that administration of rumen fluid to newborn calves has inhibitory effects on the colonization of pathogenic Escherichia coli in the intestinal 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bovis、 L. plantarum、V. alcalescens、M. elsdenii、B. fibrisolvens、P. ruminicola ss. brevis、E. faecium、R. amylophilusおよびR. albusを投与した。最初の投与後3週目に安楽殺し、ルーメン、盲腸および直腸内における定着状況を、選択培地と非選択培地で検索した。\n　成績:シバヤギのルーメン内pHは6.98、VFA濃度は2.59 mM/dlで、VFA組成比は健康なヤギのそれに似ていた。投与した9種類の細菌のうち、8菌種がルーメン内に定着していた。とくにS. bovis、P. ruminicola、R. amylophilus、B. fibrisolvens、L. plantarumはルーメン内で多数を占め、V. alcalescensは下部消化管内にくらべ約1,000倍の濃度で存在した。一方、M. eldeniiおよびE. faeciumはルーメン内にくらべ下部消化管で2-4倍高いレベルで定着していた。セルロース分解菌R. albusはどの部位にも定着していなかった。\n　結論:無菌ヤギに主要なルーメン細菌を経口投与すると、ルーメン内はもちろん、盲腸や直腸などの下部消化管にも定着する。ルーメン内のVFA濃度や構成比を調べたが、通常飼育のヤギや子牛のそれと近似していた。したがって、このシバヤギのルーメン内に定着した菌群が、子牛のVFA産生に寄与していると考えられる。\n\n　実験3.　ルーメン液早期投与による、新生子牛腸管内への病原性大腸菌の定着阻止試験\n　新生子牛下痢症は病原性大腸菌の感染が原因で、生後0-3日以内に水様下痢便を排泄し、脱水状態となって敗血症死する。いったん牛群内に発生すると死亡、発育遅延などによる経済的損失が大きい。ワクチン接種による予防が試みられているが、血清型が多岐にわたること、免疫能が未発達な時期に発症することなどのため、必ずしもよい成績が得られていない。そこで、子牛のルーメン細菌叢を早い時期に成牛のそれに近づければ、病原大腸菌の定着を阻止できるのではないかと考え、この実験を行った。\n　試験方法:(1)生後48時間の無処置対照牛1頭、(2)生後24時間目にE. coli NAS-10で攻撃した1頭、(3)生後2-3時間以内にルーメン液を投与した2頭、および(4)ルーメン液投与後21時間目にE. coli NAS-10で攻撃した3頭、計4群を設定した。ここで用いたルーメン液は、採取後のろ過液を-80°Cで保存したものである。\n　成績:ルーメン液を投与しなかった1頭は、攻撃により見ず様下痢便を排泄し死亡した。ルーメン液投与後に攻撃した群では、軽度の軟便を排泄したものの、その後は回復した。十二指腸のE. coli NAS-10の菌数は、ルーメン液非投与の子牛より、投与した子牛で著しく低く、時間とともに増加することもなかった。被攻撃群のリンパ節、脳、心、肺、腎、肝、脾からは攻撃菌が検出されたが、ルーメン液投与後の攻撃群では検出できなかった。ルーメン液投与群およびルーメン液投与後の攻撃群では、ルーメン、十二指腸、直腸に形態的に多様な細菌が定着していた。これに対応して下部消化管のVFA濃度も対照牛にくらべて著しく高かった。\n　結論:新生子牛への保存ルーメン液投与は、病原性大腸菌の腸管定着を抑制することが明らかとなった。\n\n　以上の成績を総合し、次の結論を得た。\n　1.　新生子牛への新鮮ルーメン液の経口投与は、成牛のルーメン微生物叢の早期確立および子牛の発育促進に有効であった。\n　2.　無菌ヤギへのルーメン主要細菌の経口投与試験により、セルロース分解菌以外の細菌が、ルーメン内はもちろん、下部消化管内にも定着することを確認した。\n　3.　ここで作出したノトバイオート・シバヤギは、ルーメン微生物および下部消化管の正常細菌叢と病原微生物との関係を研究するために有用な実験動物となる。\n　4.　新生子牛への保存ルーメン液の投与は、病原性大腸菌の腸管内定着を抑制する。","subitem_description_type":"Abstract"}]},"item_10006_dissertation_number_12":{"attribute_name":"学位授与番号","attribute_value_mlt":[{"subitem_dissertationnumber":"乙第372号"}]},"item_10006_version_type_18":{"attribute_name":"著者版フラグ","attribute_value_mlt":[{"subitem_version_resource":"http://purl.org/coar/version/c_ab4af688f83e57aa","subitem_version_type":"AM"}]},"item_creator":{"attribute_name":"著者","attribute_type":"creator","attribute_value_mlt":[{"creatorNames":[{"creatorName":"北, 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